En el algodón (Gossypium barbadense L.) los protocolos de regeneración de plantas vía embriogénesis somática desarrollados no describen las fases de maduración y germinación de forma separada. El presente trabajo se realizó con el objetivo de lograr la maduración y germinación de embriones somáticos de algodón (Gossypium barbadense L.) cultivar 'MSI'. Se estudiaron tres concentraciones de sacarosa (30, 60 y 90 g. L-1), dos de ABA (0.95 y 1.90 µM) y un control sin este regulador del crecimiento. Fueron evaluados el inicio de la germinación (días de cultivo) y número de embriones somáticos en etapa torpedo y cotiledonar, así como el en número de embriones con germinación completa. Además, se determinó el efecto tres concentraciones de GA3 (0.05, 0.5 y 0.1 mg. L-1) en el medio de cultivo. A los 30 días de cultivo se evaluaron las mismas variables utilizadas en la maduración. Se realizó una caracterización molecular mediante el uso de la amplificación aleatoria de ADN polimórfico. La adición de 60 g. L-1 sacarosa en el medio de cultivo de maduración sin ácido abscísico, incrementó la germinación de los embriones somáticos hasta 16 plantas por grupo de embriones (0.05 g de masa fresca). El mayor número de embriones somáticos germinados se obtuvo con 0.5 mg. L-1 y GA3 en el medio de cultivo de germinación. Se demostró la necesidad de una fase de maduración en la embriogénesis algodón para elevar el porcentaje de germinación. No se encontró polimorfismo entre las bandas en las poblaciones de plantas estudiadas, lo que demuestra la estabilidad genética de las plantas obtenidas de embriones somáticos.