Problemática: La detección y cuantificación del ARN del virus de la hepatitis C (VHC) es útil para la confirmación del ensayo serológico, la detección en período de ventana inmunológica y el seguimiento del tratamiento de la infección por VHC. Objetivo(s): Evaluar las características funcionales de un ensayo de PCR en tiempo real para la detección y cuantificación del ARN del virus de la hepatitis C (VHC) en suero y plasma humanos. Metodología: Se evaluaron los parámetros de especificidad clínica y analítica, sensibilidad, rango lineal, reproducibilidad y comparación con ensayo de referencia. Resultados y discusión: Se obtuvo una especificidad clínica y analítica del 100% para todos los genotipos del VHC. El límite de detección fue de 25 UI/mL y límite de cuantificación de 50 UI/mL, con rango lineal de cuantificación de 5,0UI/mL-1,08UI/mL. Los coeficientes de variación intra e inter-ensayos fueron inferiores al 10 %. Mostró fuerte correlación (r = 0,9100; P <0.001) con la prueba COBAS AmpliPrep /COBAS TaqMan HCV test (Roche Molecular Systems, Inc.), similar a la obtenida por otros ensayos. Conclusiones: Se demostró que el ensayo es muy sensible, específico, exacto y preciso, por lo que puede ser utilizado en diagnóstico de la hepatitis C, así como para el seguimiento de pacientes sometidos a terapias antivirales.