Simposio Internacional de Ciencias Farmacéuticas "SICF"

Simposio Internacional de Ciencias Farmacéuticas

SICF

Tecnología DELOS-susp para la obtención de liposomas con propósitos vacunales

Resumen

La tecnología de deshidratación-rehidratación para la obtención de vesículas liposomales se basa en la deshidratación de una suspensión acuosa de vesículas unilamelares pequeñas (SUV) en presencia del soluto a encapsular, seguido de una rehidratación controlada (DRVs). En este procedimiento, las SUV se obtienen por sonicación, a escala de laboratorio. La metodología DELOS-susp es un proceso manufacturado, que emplea fluidos comprimidos y permite la obtención de SUV en un único paso. En este trabajo, se evaluaron características físico-químicas de DRVs, obtenidas a partir de SUV sonicadas (DRV’s), o de DELOS-susp (DRV’d). Adicionalmente, se exploraron las respuestas inmunes específicas de antígenos (Ags) inducidas por DRV’s y DRV’d. Los lípidos utilizados fueron dipalmitoil fosfatidilcolina y colesterol (relación molar 1:1) y los Ags encapsulados, el conjugado EGF-P64k o la ovalbúmina (OVA) con la proteína inmunomoduladora Sticholisina II (StII). Las respuestas de linfocitos T citotóxicos específicas a OVA y la respuesta de anticuerpos inducida por EGF-P64k se evaluaron en ratones C57BL/6 con el uso de DRV’s y DRV’d. Ambos tipos de vesículas exhibieron eficiencias de encapsulación similares y sin diferencias estadísticas: EGF-P64k (≈30%), OVA (≈50%) y StII (≈55%). Asimismo, se corroboró la inducción de respuesta de células T CD8+ efectora, específica a OVA, y anticuerpos de isotipo IgG específicos por el EGF, estadísticamente similares con ambas formulaciones liposomales. Estos resultados sugieren la factibilidad de sustituir la etapa de sonicación por DELOS-susp, en el procedimiento de obtención de liposomas mediante deshidratación-rehidratación, que permitirá el escalado productivo de estas formulaciones como inmunoadyuvantes.

Abstract

 The dehydration-rehydration technology for obtaining liposomal vesicles is based on the dehydration of a suspension of small unilamellar vesicles (SUV) in the presence of the solute to be encapsulated, followed by a controlled rehydration (DRVs). In this procedure, SUV are obtained by sonication on a laboratory scale.  DELOS-susp methodology is a manufactured process based on compressed fluids that allows obtaining SUV in a single step. In this work, physicochemical characteristics of DRVs obtained from sonicated SUV (DRV's) or from DELOS-susp (DRV’d), were evaluated. Additionally, the antigen-specific immune responses induced by these two liposomal formulations were also explored. The lipids used were dipalmitoyl phosphatidylcholine and cholesterol (1: 1 molar ratio) and the antigens (Ags) encapsulated were the EGF-P64k conjugate or the ovalbumin (OVA) with the immunomodulatory protein Sticholysin II (StII). The OVA-specific cytotoxic T lymphocytes and the EGF-P64k-induced antibody responses were evaluated in C57BL/6 mice using DRV's and DRV'd. Both types of vesicles exhibited similar encapsulation efficiencies without statistic differences: EGF-P64k (≈30%), OVA (≈50%) and StII (≈55%). Likewise, statistically similar responses of OVA-specific effector CD8+ T cells and of EGF-specific IgG isotype antibodies, were corroborated with both liposomal formulations. These results suggest the feasibility of substituting the sonication step for DELOS-susp in the procedure for obtaining liposomes by dehydration-rehydration, which will enable the productive scaling of these liposomal formulations as immunoadjuvants


Sobre el ponente

María del Carmen Luzardo Lorenzo

Prof. María del Carmen Luzardo Lorenzo

UH Flag of Cuba


Información Práctica
Ponencia
Spanish / Español
noviembre 25, 2021 1:48 p. m.
15 minutos
L14
Autores
Prof. María del Carmen Luzardo Lorenzo
Lidia Ballell i Hosa
Lidia Ferrer Tasies
Isbel Lopetegui González
Anaixis del Valle Peña
Nelson Acosta Rivero
Rady Judith Laborde Quintana
Yerandy Hechavarría Luna
Yadira Cazañas Quintana
Judith Raymond Pous
Carlos Jordan González Castillo
Julio Felipe Santo-Tomás Pompa
Alexis Musacchio Lasa
Joseph Merlo
Nora Ventosa
María Eliana Lanio Ruiz
Palabras clave
compressed fluid-based method
conjugado egf-p64k
cytotoxic t lymphocytes
dehydration-rehydration procedure
delos-susp
egf-p64k conjugate
linfocitos t citotóxicos
método basado en fluidos comprimidos
procedimiento de deshidratación-rehidratación
sticholisina ii
sticholysin ii
Documentos


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