El Montanide ISA51VG es el adyuvante empleado para la administración en forma de emulsión del antígeno de la vacuna CIMAvax-EGF®, producida en el Centro de Inmunología Molecular para el tratamiento del cáncer de pulmón. En la presentación comercial de la vacuna el adyuvante se encuentra independiente al antígeno, por lo que se requiere la verificación de sus atributos de calidad. El ensayo de biocarga se describe en las Farmacopeas para la enumeración de microorganismos mesófilos, pero dada la naturaleza oleosa de este producto, se complejiza su optimización. El objetivo del trabajo fue validar el ensayo de biocarga del Montanide ISA51VG por el método de filtración en membrana. Este método se considera un ensayo de límites de impurezas, por lo que se evaluó los parámetros de especificidad, límite de detección y precisión. Se determinó la dilución óptima para el producto (1/10) y se establecieron cinco lavados con solución de Caldo peptona cloruro de sodio con Polisorbato 80 al 0,1%. Mediante el diseño experimental y el análisis de los resultados se demostró que el método es específico, con recobrados como indicativo de interferencias mayor del 70% para medios generales y del 50% para medios selectivos en todas las cepas de referencia empleadas. Se demostró que el método es preciso asociada a la naturaleza del producto y se determinó un límite de detección de 10 UFC. El ensayo de biocarga para el Montanide ISA51VG, cumple con los criterios de aceptación establecidos y se considera adecuado para el propósito del mismo.