VIII International Symposium on Chemistry and Pharmaceutical Sciences

SICF

VIII Symposium "Design, Obtaining and Development of Drugs"

Validation of the bioburden assay for Montanode ISA 51 VG using the membrane filtration method.

Abstract

Montanide ISA51VG is the adjuvant used for the administration in the form of an emulsion of the antigen of the CIMAvax-EGF® vaccine, produced at the Center for Molecular Immunology for the treatment of lung cancer. In the commercial presentation of the vaccine, the adjuvant is independent of the antigen, so verification of its quality attributes is required. The bioburden test is described in the Pharmacopoeias for the enumeration of mesophilic microorganisms, but given the oily nature of this product, its optimization is complicated. The objective of the work was to validate the Montanide ISA51VG bioburden assay by the membrane filtration method. This method is considered an impurity limits assay, so the parameters of specificity, detection limit and precision were evaluated. The optimal dilution for the product was determined (1/10) and five washes were established with a solution of Peptone Sodium Chloride Broth with 0.1% Polysorbate 80. Through the experimental design and analysis of the results, it was demonstrated that the method is specific, with recoveries indicative of interferences greater than 70% for general media and 50% for selective media in all the reference strains used. It was demonstrated that the method is accurate associated with the nature of the product and a detection limit of 10 CFU was determined. The bioburden assay for Montanide ISA51VG meets the established acceptance criteria and is considered adequate for its purpose.

Resumen

El Montanide ISA51VG es el adyuvante empleado para la administración en forma de emulsión del antígeno de la vacuna CIMAvax-EGF®, producida en el Centro de Inmunología Molecular para el tratamiento del cáncer de pulmón. En la presentación comercial de la vacuna el adyuvante se encuentra independiente al antígeno, por lo que se requiere la verificación de sus atributos de calidad. El ensayo de biocarga se describe en las Farmacopeas para la enumeración de microorganismos mesófilos, pero dada la naturaleza oleosa de este producto, se complejiza su optimización. El objetivo del trabajo fue validar el ensayo de biocarga del Montanide ISA51VG por el método de filtración en membrana. Este método se considera un ensayo de límites de impurezas, por lo que se evaluó los parámetros de especificidad, límite de detección y precisión. Se determinó la dilución óptima para el producto (1/10) y se establecieron cinco lavados con solución de Caldo peptona cloruro de sodio con Polisorbato 80 al 0,1%. Mediante el diseño experimental y el análisis de los resultados se demostró que el método es específico, con recobrados como indicativo de interferencias mayor del 70% para medios generales y del 50% para medios selectivos en todas las cepas de referencia empleadas. Se demostró que el método es preciso asociada a la naturaleza del producto y se determinó un límite de detección de 10 UFC. El ensayo de biocarga para el Montanide ISA51VG, cumple con los criterios de aceptación establecidos y se considera adecuado para el propósito del mismo.