VII Simposio Internacional de Ciencias Farmacéuticas 2019 "VII SICF" -VII Simposio "Diseño, Obtención y Desarrollo de Fármacos"

VII Simposio Internacional de Ciencias Farmacéuticas 2019

VII SICF

INFLUENCIA DEL MEDIO DE CULTIVO PARA LA OBTENCIÓN DE LA PROTEÍNA ESTREPTOQUINASA RECOMBINANTE

Resumen [ES]

Desde el año 1989 se produce en el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) la Estreptoquinasa recombinante (SKr) para su uso como agente trombolítico. En los últimos años en Cuba se han venido obteniendo resultados favorables en estudios clínicos con el empleo de esta molécula para el tratamiento de las hemorroides. Debido a la necesidad de contar con un proceso tecnológico que cumpla con los requerimientos regulatorios de las Buenas Prácticas de Manufactura (GMP) y a los planes de venta de un nuevo producto para la trombosis hemorroidal. Se decidió desarrollar un medio de expresión químicamente definido (MQD) suplementado por los aminoácidos Ile, His, Asn y Trp a concentraciones de 210, 46, 30 y 76 mg/L, respectivamente que permitió obtener un crecimiento de la cepa productora de 7,8 ± 0,1 UDO y expresión de SKr de 21,0 ± 0,7 %. Se establecieron las condiciones de operación del fermentador de 7 L, velocidad de agitación y flujo de aire igual a 500 rpm y 3,6 L/min respectivamente, donde se logran valores de crecimiento celular y expresión de la proteína de interés, similares a los obtenidos a nivel de zaranda con el mismo medio de cultivo. El sistema de expresión está basado en el empleo de la cepa W3110 de Escherichia coli, bajo el control del promotor triptófano y emplea como marcador de selección el gen que confiere resistencia al antibiótico Kanamicina.

Resumen [EN]

Desde el año 1989 se produce en el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) la Estreptoquinasa recombinante (SKr) para su uso como agente trombolítico. En los últimos años en Cuba se han venido obteniendo resultados favorables en estudios clínicos con el empleo de esta molécula para el tratamiento de las hemorroides. Debido a la necesidad de contar con un proceso tecnológico que cumpla con los requerimientos regulatorios de las Buenas Prácticas de Manufactura (GMP) y a los planes de venta de un nuevo producto para la trombosis hemorroidal. Se decidió desarrollar un medio de expresión químicamente definido (MQD) suplementado por los aminoácidos Ile, His, Asn y Trp a concentraciones de 210, 46, 30 y 76 mg/L, respectivamente que permitió obtener un crecimiento de la cepa productora de 7,8 ± 0,1 UDO y expresión de SKr de 21,0 ± 0,7 %. Se establecieron las condiciones de operación del fermentador de 7 L, velocidad de agitación y flujo de aire igual a 500 rpm y 3,6 L/min respectivamente, donde se logran valores de crecimiento celular y expresión de la proteína de interés, similares a los obtenidos a nivel de zaranda con el mismo medio de cultivo. El sistema de expresión está basado en el empleo de la cepa W3110 de Escherichia coli, bajo el control del promotor triptófano y emplea como marcador de selección el gen que confiere resistencia al antibiótico Kanamicina.

Sobre el ponente

Marlen Herrera

Ing. Marlen Herrera

Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) Flag of Cuba
Información Práctica
English (US)
No definido
30 minutos
No definido
Autores
Lic. Victoria M. Lugo Hernandez
Ing. Michel Díaz Martínez
Ing. Marlen Herrera
Msc. Laura Varas Sarzo
Alina Yelina Ricardo de La Fe
Ing. Analeydis García Labaceno
Palabras clave
cepa w3110
escherichia coli
estreptoquinasa recombinante
triptófano y promotor