VII Simposio Internacional de Ciencias Farmacéuticas 2019 "VII SICF" -VII Simposio "Diseño, Obtención y Desarrollo de Fármacos"

VII Simposio Internacional de Ciencias Farmacéuticas 2019

VII SICF

Síntesis de una inmunotoxina a partir del anticuerpo anti-CD20 y la mutante W111C de la Sticholisina I para el tratamiento del cáncer.

Resumen [ES]

Las inmunotoxinas constituyen una novedosa alternativa para el tratamiento del cáncer, ya que combinan la potente actividad citotóxica de las toxinas con la elevada especificidad de los anticuerpos monoclonales mediante el empleo de un enlace covalente entre ambos componentes. El presente trabajo explora estrategias de modificación de los anticuerpos para su posterior conjugación a un agente citotóxico. Específicamente, se evaluaron dos metodologías: la utilización de los grupos aminos del anticuerpo para su conjugación mediante un conector por adición de Michael, y otra basada en la generación de grupos tioles mediante la reducción de los enlaces disulfuro presentes en los anticuerpos. Se utilizó el anticuerpo monoclonal 1B8 (anti CD20), producido en el CIM; y la mutante W111C de la toxina Sticholisina I, que presenta una actividad citotóxica en el orden nanomolar. Se establecieron las condiciones de reducción de los puentes disulfuro y el re-ensamblaje del anticuerpo empleando cromatografía en gel de poliacrilamida. De manera similar se establecieron las condiciones experimentales para la incorporación de grupos maleimido utilizando un reactivo heterobifuncional y su posterior conjugación a la toxina. Los conjugados obtenidos se caracterizaron mediante técnicas físico-químicas e inmunoquímicas. Se demostró la conservación de la especificidad del anticuerpo conjugado por citometría de flujo y la capacidad hemolítica del conjugado, debida a la presencia de la mutante W111C conjugada. Como conclusión, se implementaron dos procedimientos de conjugación que permiten establecer un enlace covalente entre un anticuerpo monoclonal y la mutante W111C de la toxina Sticholisina I.

Resumen [EN]

Las inmunotoxinas constituyen una novedosa alternativa para el tratamiento del cáncer, ya que combinan la potente actividad citotóxica de las toxinas con la elevada especificidad de los anticuerpos monoclonales mediante el empleo de un enlace covalente entre ambos componentes. El presente trabajo explora estrategias de modificación de los anticuerpos para su posterior conjugación a un agente citotóxico. Específicamente, se evaluaron dos metodologías: la utilización de los grupos aminos del anticuerpo para su conjugación mediante un conector por adición de Michael, y otra basada en la generación de grupos tioles mediante la reducción de los enlaces disulfuro presentes en los anticuerpos. Se utilizó el anticuerpo monoclonal 1B8 (anti CD20), producido en el CIM; y la mutante W111C de la toxina Sticholisina I, que presenta una actividad citotóxica en el orden nanomolar. Se establecieron las condiciones de reducción de los puentes disulfuro y el re-ensamblaje del anticuerpo empleando cromatografía en gel de poliacrilamida. De manera similar se establecieron las condiciones experimentales para la incorporación de grupos maleimido utilizando un reactivo heterobifuncional y su posterior conjugación a la toxina. Los conjugados obtenidos se caracterizaron mediante técnicas físico-químicas e inmunoquímicas. Se demostró la conservación de la especificidad del anticuerpo conjugado por citometría de flujo y la capacidad hemolítica del conjugado, debida a la presencia de la mutante W111C conjugada. Como conclusión, se implementaron dos procedimientos de conjugación que permiten establecer un enlace covalente entre un anticuerpo monoclonal y la mutante W111C de la toxina Sticholisina I.

Sobre el ponente

Marianniz Díaz Hernández

Miss Marianniz Díaz Hernández

UH Flag of Cuba

Study Chemistry at University of Havana

Información Práctica
Spanish / Español
No definido
30 minutos
No definido
Autores
Javiel Fernández Marrero
Miss Marianniz Díaz Hernández
Manuel Garcia Ricardo
Janoi Chang Calderón.
Denise Dorvinigt Pedroso
Palabras clave
anti-cd20
inmunotoxina
mutante w111c de sti