La lista de sustancias prohibidas que la Agencia Mundial Antidopaje (AMA) emite cada año abarca un grupo considerable de compuestos. Dentro de esta, se encuentra el grupo S6, que corresponde a los estimulantes. Estas sustancias, causan un efecto estimulante directo en el sistema nervioso central (SCN), provocando un incremento en el rendimiento de los atletas. Por ello son considerados agentes dopantes y uno de los más utilizados por los deportistas para mejorar sus marcas. El objetivo de esta investigación, consistió en el montaje y validación cualitativa de una metodología analítica para la determinación simultánea de 13 estimulantes. El equipo empleado fue un Cromatógrafo Líquido acoplado a un Espectrómetro de Masas en tándem con un triple cuadrupolo (UPLC-MS/MS), con una interfase de ionización electrospray en modo positivo. El tratamiento previo de la muestra llevado a cabo fue una extracción líquido-líquido, empleando éter etílico como disolvente de extracción. Debido al carácter básico que presentan los estimulantes (función amina en su estructura), fue preciso trabajar a pH=14. El procedimiento fue validado en términos de especificidad, precisión intra e inter-ensayo; contaminación entre muestras, recobrado, robustez y efecto matriz en H2O y orina, obteniéndose resultados satisfactorios. Los límites de detección se encontraron por debajo de los 25ng/mL, para la mayoría de los compuestos analizados, aspecto a destacar ya que se determinaron concentraciones mucho menores que las exigidas por la AMA. El método fue aplicado satisfactoriamente en muestras reales, comprobando su efectividad para la determinación de los compuestos analizado, sin la posibilidad de dar falsos positivos.