7th International Chemistry Symposium
SIQ 2019
Resumen: Problemática: El itolizumab, es un anticuerpo (Ac) humanizado que reconoce de manera específica la molécula CD6 humana, un antígeno de diferenciación leucocitario, que se expresa en los linfocitos T maduros, así como en las células tumorales de la leucemia linfocítica crónica (LLC). Contar en el departamento de control de la calidad con un método validado para la estimación de la actividad biológica de cada lote del producto aumenta el nivel regulatorio del laboratorio y con ello se garantiza la seguridad y la eficacia clínica del producto. Objetivos: Demostrar la especificidad, exactitud, precisión y robustez de un ensayo in vitro por citometría de flujo para estimar la actividad biológica (AB) del itolizumab. Metodología: Se propone un ensayo de reconocimiento por citometría de flujo, utilizando la línea celular HEK-293cultivada en DMEM a un 10% de SFB. Se evaluaron por duplicados diluciones doble seriadas del AcM y el material de referencia (MRT). La potencia se estimó por el método logístico no lineal de 4 parámetros. La validación se realizó conforme las guías ICH. Resultados y discusión: Se demostró que el método es robusto, específico, exacto y preciso en el rango de concentraciones entre 0.016 a 16 μg mL -1 con una variabilidad menor del 20%. Conclusiones: El ensayo propuesto permite evaluar la potencia del itolizumab, determinar cambios en la actividad biológica del AcM y puede emplearse en los estudios de estabilidad. El monitoreo continuo del ensayo puede realizarse a través de gráficos de control de la respuesta de las muestras y del MRT. Abstract: Problematic: Itolizumab is a humanized antibody (Ac) that specifically recognizes the human CD6 molecule, a leukocyte differentiation antigen, which is expressed in mature T lymphocytes, as well as in the tumor cells of chronic lymphocytic leukemia (CLL). Having the quality control department with a validated method for estimating the biological activity of each batch of the product increases the regulatory level of the laboratory and thereby guarantees the safety and clinical efficacy of the product. Objetive: To demonstrate the specificity, accuracy, precision and robustness of in vitro assay by flow cytometry to estimate the biological activity (AB) of itolizumab. Metodology: A recognition assay is proposed by flow cytometry, using the HEK-293 cell line grown in DMEM at 10% FBS. Double-serial dilutions of the MAb and the reference material (MRT) were evaluated in duplicate. The power was estimated by the non-linear 4-parameter logistic method. The validation was carried out according to the ICH guidelines. Results y discussion: It was shown that the method is robust, specific, accurate and precise in the range of concentrations between 0.016 to 16 μg mL -1 with a variability of less than 20%. Conclusions: The proposed test allows to evaluate the potency of itolizumab, to determine changes in the biological activity of the MAb and can be used in stability studies. The continuous monitoring of the test can be done through control charts of the response of the samples and the MRT.
Resumen: Problemática: El itolizumab, es un anticuerpo (Ac) humanizado que reconoce de manera específica la molécula CD6 humana, un antígeno de diferenciación leucocitario, que se expresa en los linfocitos T maduros, así como en las células tumorales de la leucemia linfocítica crónica (LLC). Contar en el departamento de control de la calidad con un método validado para la estimación de la actividad biológica de cada lote del producto aumenta el nivel regulatorio del laboratorio y con ello se garantiza la seguridad y la eficacia clínica del producto. Objetivos: Demostrar la especificidad, exactitud, precisión y robustez de un ensayo in vitro por citometría de flujo para estimar la actividad biológica (AB) del itolizumab. Metodología: Se propone un ensayo de reconocimiento por citometría de flujo, utilizando la línea celular HEK-293cultivada en DMEM a un 10% de SFB. Se evaluaron por duplicados diluciones doble seriadas del AcM y el material de referencia (MRT). La potencia se estimó por el método logístico no lineal de 4 parámetros. La validación se realizó conforme las guías ICH. Resultados y discusión: Se demostró que el método es robusto, específico, exacto y preciso en el rango de concentraciones entre 0.016 a 16 μg mL -1 con una variabilidad menor del 20%. Conclusiones: El ensayo propuesto permite evaluar la potencia del itolizumab, determinar cambios en la actividad biológica del AcM y puede emplearse en los estudios de estabilidad. El monitoreo continuo del ensayo puede realizarse a través de gráficos de control de la respuesta de las muestras y del MRT. Abstract: Problematic: Itolizumab is a humanized antibody (Ac) that specifically recognizes the human CD6 molecule, a leukocyte differentiation antigen, which is expressed in mature T lymphocytes, as well as in the tumor cells of chronic lymphocytic leukemia (CLL). Having the quality control department with a validated method for estimating the biological activity of each batch of the product increases the regulatory level of the laboratory and thereby guarantees the safety and clinical efficacy of the product. Objetive: To demonstrate the specificity, accuracy, precision and robustness of in vitro assay by flow cytometry to estimate the biological activity (AB) of itolizumab. Metodology: A recognition assay is proposed by flow cytometry, using the HEK-293 cell line grown in DMEM at 10% FBS. Double-serial dilutions of the MAb and the reference material (MRT) were evaluated in duplicate. The power was estimated by the non-linear 4-parameter logistic method. The validation was carried out according to the ICH guidelines. Results y discussion: It was shown that the method is robust, specific, accurate and precise in the range of concentrations between 0.016 to 16 μg mL -1 with a variability of less than 20%. Conclusions: The proposed test allows to evaluate the potency of itolizumab, to determine changes in the biological activity of the MAb and can be used in stability studies. The continuous monitoring of the test can be done through control charts of the response of the samples and the MRT.
About The Speaker
Lic. Dainelis Torres Rabasa
