VII Simposio Internacional de Química 2019 "SIQ 2019" -VII Conferencia "Ciencias Químicas"

VII Simposio Internacional de Química 2019

SIQ 2019

La electroforesis capilar como un método de caracterización de anticuerpos monoclonales

Resumen [ES]

Problemática: La electroforesis capilar en gel es un método de separación de proteínas utilizado en la industria biofarmacéutica debido a sus ventajas con respecto a técnicas convencionales. Objetivo: Evaluar el desempeño del método de electroforesis capilar en gel para la identificación de anticuerpos monoclonales. Metodología: Se empleó un equipo PA 800plus (Beckman Coulter, USA) y el Kit SDS-MW. Se evaluaron muestras en condiciones reductoras y no reductoras. Resultados y discusión: Se estandarizó la obtención de la curva de calibración empleando el estándar de masa molecular. Se determinó que el método es preciso en condiciones reducidas, ya que los coeficientes de variación de repetibilidad y precisión intermedia, tanto para las cadenas pesada y ligera del anticuerpo monoclonal, como para el estándar interno de 10 KDa, se encontraron por debajo del límite aceptable para este método analítico. Se comprobó que el método de SDS-MW es específico. No se detectaron interferencias con la matriz de formulación de las muestras y se encontraron diferencias entre los electroferogramas obtenidos de otras moléculas evaluadas con respecto al racotumomab. Se determinó que el método no es capaz de identificar de manera específica diferentes anticuerpos monoclonales del mismo isotipo. Se demostró que en las muestras sometidas a condiciones de estrés, se producen cambios estructurales que afectan los resultados del ensayo. Conclusiones: Se desarrolló un método específico y preciso de electroforesis capilar en gel capaz de identificar de manera eficiente AcM bajo condiciones reductoras y no reductoras.

Resumen [EN]

Problemática: La electroforesis capilar en gel es un método de separación de proteínas utilizado en la industria biofarmacéutica debido a sus ventajas con respecto a técnicas convencionales. Objetivo: Evaluar el desempeño del método de electroforesis capilar en gel para la identificación de anticuerpos monoclonales. Metodología: Se empleó un equipo PA 800plus (Beckman Coulter, USA) y el Kit SDS-MW. Se evaluaron muestras en condiciones reductoras y no reductoras. Resultados y discusión: Se estandarizó la obtención de la curva de calibración empleando el estándar de masa molecular. Se determinó que el método es preciso en condiciones reducidas, ya que los coeficientes de variación de repetibilidad y precisión intermedia, tanto para las cadenas pesada y ligera del anticuerpo monoclonal, como para el estándar interno de 10 KDa, se encontraron por debajo del límite aceptable para este método analítico. Se comprobó que el método de SDS-MW es específico. No se detectaron interferencias con la matriz de formulación de las muestras y se encontraron diferencias entre los electroferogramas obtenidos de otras moléculas evaluadas con respecto al racotumomab. Se determinó que el método no es capaz de identificar de manera específica diferentes anticuerpos monoclonales del mismo isotipo. Se demostró que en las muestras sometidas a condiciones de estrés, se producen cambios estructurales que afectan los resultados del ensayo. Conclusiones: Se desarrolló un método específico y preciso de electroforesis capilar en gel capaz de identificar de manera eficiente AcM bajo condiciones reductoras y no reductoras.

Sobre el ponente

Danais Vidal Rosell

MsC. Danais Vidal Rosell

Flag of Cuba
Información Práctica
Spanish / Español
No definido
30 minutos
No definido
Autores
Vladimir peña
Jennifer rojas
MsC. Danais Vidal Rosell
Yisel quintana
Palabras clave
anticuerpos monoclonales
electroforesis capilar en gel