VII Simposio Internacional de Química 2019 "SIQ 2019" -VII Conferencia "Ciencias Químicas"

VII Simposio Internacional de Química 2019

SIQ 2019

Un triple mutante de la toxina Sticholysina II, probablemente incapaz de interactuar con membranas lipídicas

Resumen [ES]

Problemática: StII, proteína formadora de poros de la anémona Stichodactyla heliantus, co-encapsulada en liposomas con ovoalbúmina, ha sido explorada como candidato vacunal para potenciar la respuesta citotóxica de linfocitos T antígeno-específica. La capacidad para estimular dicha respuesta parece no depender de la capacidad formadora de poros y sí de la activación de TLR4 en las células presentadoras de antígeno, lo que pudiera deberse a una interacción directa o a cascadas de señalización desencadenadas por su unión a la membrana lipídica. La disponibilidad de un mutante de StII con capacidad de unión a membranas lipídicas limitada podría ayudar a profundizar en este fenómeno. Objetivos: Caracterizar conformacional y funcionalmente el mutante StII W110.114A_Y111A (StII3A).  Metodología: Con vistas a la caracterización estructural, se evaluó la emisión de fluorencencia de los triptófanos en solución y su atenuación por acrilamida. Para la caracterización funcional, se evaluó la actividad hemolítica frente a eritrocitos humanos, la interacción con monocapas lipídicas de composición palmitoil-oleil-fosfatidilcolina (POPC): esfingomielina (SM) 85:15 y POPC:SM:colesterol 1:1:1 y la unión a liposomas de igual composición mediante ensayos de fluorescencia de los triptófanos. Resultados y Discusión: StII3A alcanzó el valor máximo de emisión de fluorescencia de los triptófanos a una menor longitud de onda y con menor intensidad, no se insertó en monocapas ni se unió a liposomas de las composiciones lipídicas evaluadas y no mostró actividad hemolítica.  Conclusiones:  StII3A exhibe una conformación similar a la de la proteína salvaje.  StII3A no se une a membranas lipídicas de composición POPC:SM 85:15 y POPC:SM:colesterol 1:1:1.  StII3A no presenta actividad formadora de poros.

Resumen [EN]

Problemática: StII, proteína formadora de poros de la anémona Stichodactyla heliantus, co-encapsulada en liposomas con ovoalbúmina, ha sido explorada como candidato vacunal para potenciar la respuesta citotóxica de linfocitos T antígeno-específica. La capacidad para estimular dicha respuesta parece no depender de la capacidad formadora de poros y sí de la activación de TLR4 en las células presentadoras de antígeno, lo que pudiera deberse a una interacción directa o a cascadas de señalización desencadenadas por su unión a la membrana lipídica. La disponibilidad de un mutante de StII con capacidad de unión a membranas lipídicas limitada podría ayudar a profundizar en este fenómeno. Objetivos: Caracterizar conformacional y funcionalmente el mutante StII W110.114A_Y111A (StII3A).  Metodología: Con vistas a la caracterización estructural, se evaluó la emisión de fluorencencia de los triptófanos en solución y su atenuación por acrilamida. Para la caracterización funcional, se evaluó la actividad hemolítica frente a eritrocitos humanos, la interacción con monocapas lipídicas de composición palmitoil-oleil-fosfatidilcolina (POPC): esfingomielina (SM) 85:15 y POPC:SM:colesterol 1:1:1 y la unión a liposomas de igual composición mediante ensayos de fluorescencia de los triptófanos. Resultados y Discusión: StII3A alcanzó el valor máximo de emisión de fluorescencia de los triptófanos a una menor longitud de onda y con menor intensidad, no se insertó en monocapas ni se unió a liposomas de las composiciones lipídicas evaluadas y no mostró actividad hemolítica.  Conclusiones:  StII3A exhibe una conformación similar a la de la proteína salvaje.  StII3A no se une a membranas lipídicas de composición POPC:SM 85:15 y POPC:SM:colesterol 1:1:1.  StII3A no presenta actividad formadora de poros.

Sobre el ponente

Ada Laura Rivero Hernández

Lic. Ada Laura Rivero Hernández

Facultad de Biología, Universidad de La Habana Flag of Cuba
Información Práctica
English (US)
No definido
30 minutos
No definido
Autores
María Eliana Lanio Ruiz
Lic. Ada Laura Rivero Hernández
Belinda Sánchez Ramírez
Uris Ross Quincoces
Felipe Adonis Escalona Rodríguez
Fabiola Pazos Santos
Mario Ernesto Valdés Tresanco
Yadira de La Patria Hervis Valdés
Palabras clave
interacción proteína-membrana
proteína formadora de poros
sticholysina ii