10th International Scientific Conference on Agricultural Development and Sustainability

16th Symposium of Plant Protection

Biological and molecular characterization of potyviruses present in Cucurbita moschata plants in Cuba

Abstract

Problem: Cucurbitaceae (Cucurbitaceae) have excellent agronomic characteristics and play an important role in agricultural production as a primary source of vegetables and fruits. However, these crops are affected by several diseases, including those caused by viruses, which have not been well documented in our country. Objective: To characterize potyviruses affecting Cucurbita moschata in Cuba for the establishment of methodologies in the management of diseases associated with these viruses. Methodology: Prospecting was carried out in producing regions and yards of several provinces and samples with symptomatologies similar to those induced by viruses were collected. For molecular detection, total RNA was purified using the RNeasy Plant Mini kit (QIAGEN) and cDNA was synthesized from 1 μg of total RNA using the High Capacity cDNA Reverse Transcription kit (Applied Biosystems). Generic primers for potyviruses were used in the RT-PCR reactions, the products of which were sequenced and analyzed for homology search in the GenBank database. Results and discussion: Mosaic and chlorosis symptoms were the most observed among the C. moschata plants analyzed. Papaya ringspot virus (PRSV) isolates were detected and characterized in 6 provinces of the country showing a wide dispersion. Conclusions: Isolates of PRSV-W are characterized in C. moschata plants for the first time in Cuba, where a great variety of viral symptoms are presented.

Resumen

Problemática: Las cucurbitáceas (Cucurbitaceae) poseen excelentes características agronómicas, ocupando un papel importante en la producción agrícola como fuente primaria de vegetales y frutas. No obstante, estos cultivos son afectados por diversas enfermedades entre las que se encuentran las causadas por virus, las cuales no han sido bien documentadas en nuestro país. Objetivo: Caracterizar los potyvirus que afectan Cucurbita moschata en Cuba para el establecimiento de metodologías en el manejo de las enfermedades asociadas a estos virus. Metodología: Se hicieron prospecciones en regiones productores y patios de varias provincias y se colectaron muestras con sintomatologías similares a las inducidas por virus. Para la detección molecular, el ARN total se purificó mediante el uso del RNeasy Plant Mini kit (QIAGEN) y el ADNc fue sintetizado a partir de 1 μg de ARN total mediante el uso del High Capacity cDNA Reverse Transcription kit (Applied Biosystems). En las reacciones de RT-PCR se utilizaron cebadores genéricos para potyvirus, cuyos productos fueron secuenciados y analizados para la búsqueda de homología en la basa de datos del GenBank. Resultados y discusión: Los síntomas de mosaico y clorosis fueron las más observados entre las plantas de C. moschata analizadas. Se detectó y caracterizaron aislados de papaya ringspot virus (PRSV) en 6 provincias del país mostrando una amplia dispersión. Conclusiones: Se caracterizan aislados de PRSV-W en plantas de C. moschata por primera vez en Cuba, donde se presentan una gran variedad de síntomas virales.