VII Simposio Internacional de Ciencias Farmacéuticas 2019 "VII SICF" -VII Simposio "Diseño, Obtención y Desarrollo de Fármacos"

VII Simposio Internacional de Ciencias Farmacéuticas 2019

VII SICF

Estandarización de un Elisa para la cuantificación de IgG contra VME de Salmonella Paratyphi A

Resumen [ES]

Salmonella Paratyphi A es un patógeno exclusivo de humanos, es la segunda causa más común de fiebre entérica en el sudeste asiático y recientemente se ha incrementado su incidencia en Estados unidos. Actualmente no existen vacunas licenciadas contra este patógeno. El Instituto Finlay de Vacunas se encuentra trabajando en la obtención de un candidato vacunal basado en vesículas de membrana externa (VME) contra S. Paratyphi A, por lo que se hizo necesario contar con una técnica para la evaluación de su inmunogenicidad. El objetivo de este trabajo fue el montaje y la estandarización de un ELISA para la cuantificación de anticuerpos IgG contra VME de S. Paratyphi A. Para la estandarización de este ELISA se empleó un suero hiperinmune generado en ratones Balb/c inmunizados con células inactivadas de S. Paratyphi A que mostró valores de absorbancia anti-OMV superiores a 1,0 por ELISA indirecto. Se determinaron las mejores condiciones de este ensayo en cuanto a concentración óptima de recubrimiento, tiempos de incubación y dilución de trabajo del conjugado. Además, se definió el intervalo y linealidad de la curva, la precisión intra e interensayo, la especificidad y el límite de detección. La curva de calibración presentó un buen ajuste lineal con un R2 =0.98. Los coeficientes de variación en los ensayos de precisión intra e interensayo estuvieron en los intervalos establecidos para cada uno (10%,20% respectivamente). Los resultados obtenidos avalan el empleo de este ELISA cuantitativo para evaluare la inmunogenicidad de formulaciones de VME de S. Paratyphi A en fases de investigación y desarrollo.

Resumen [EN]

Salmonella Paratyphi A es un patógeno exclusivo de humanos, es la segunda causa más común de fiebre entérica en el sudeste asiático y recientemente se ha incrementado su incidencia en Estados unidos. Actualmente no existen vacunas licenciadas contra este patógeno. El Instituto Finlay de Vacunas se encuentra trabajando en la obtención de un candidato vacunal basado en vesículas de membrana externa (VME) contra S. Paratyphi A, por lo que se hizo necesario contar con una técnica para la evaluación de su inmunogenicidad. El objetivo de este trabajo fue el montaje y la estandarización de un ELISA para la cuantificación de anticuerpos IgG contra VME de S. Paratyphi A. Para la estandarización de este ELISA se empleó un suero hiperinmune generado en ratones Balb/c inmunizados con células inactivadas de S. Paratyphi A que mostró valores de absorbancia anti-OMV superiores a 1,0 por ELISA indirecto. Se determinaron las mejores condiciones de este ensayo en cuanto a concentración óptima de recubrimiento, tiempos de incubación y dilución de trabajo del conjugado. Además, se definió el intervalo y linealidad de la curva, la precisión intra e interensayo, la especificidad y el límite de detección. La curva de calibración presentó un buen ajuste lineal con un R2 =0.98. Los coeficientes de variación en los ensayos de precisión intra e interensayo estuvieron en los intervalos establecidos para cada uno (10%,20% respectivamente). Los resultados obtenidos avalan el empleo de este ELISA cuantitativo para evaluare la inmunogenicidad de formulaciones de VME de S. Paratyphi A en fases de investigación y desarrollo.

Sobre el ponente

Yisabel Aranguren

Lic. Yisabel Aranguren

Instituto Finlay de Vacunas Flag of Cuba
Información Práctica
Spanish / Español
No definido
30 minutos
No definido
Autores
Mabel Hernández
Reinaldo Acevedo
Yisabel Aranguren
Darcy Núñez
Yosbany Pérez
Caridad Zayas
Dagmar García
Lic. Yisabel Aranguren
Sonsire Fernández
Kirenia Blain
Maylin Álvarez
Jean Pierre Soubal
Palabras clave
elisa
estandarización
salmonella paratyphi a
vesículas de membrane externa