VIII International Symposium on Chemistry and Pharmaceutical Sciences

SIPN

4th International Symposium "Chemistry of natural products”

Development of a HPLC method for the determination of diosgenin

Abstract

· Problemática to deal with: Agave brittoniana Trel. Brachypus species (A. brittoniana), endemic to the central region of Cuba, with the majority secondary metabolite steroidal saponins, which can present multiple pharmacological actions. It is necessary to develop an analytical technique for the detection of steroidal sapogenins in the extracts obtained from the leaves of the species A. brittoniana.

· Aims: Determine chromatographic conditions for the diosgenin detection technique by high-performance liquid chromatography and apply it for the detection of steroidal sapogenins present in the hydrolyzed butanolic extract of A. brittoniana leaves.

· Methodology: Operational conditions were established by HPLC for the determination of diosgenin, steroidal sapogenin similar to yucagenin present in the plant extract, with a C18 column, flow 1 mL/min, injection volume of 20 µL, at 35°C, UV-Vis detection; modifying the proportion of the mobile phase and the detection wavelength. A preliminary linearity test was carried out in a concentration range of 0.005 to 0.2 mg/mL. The methodology was applied for the detection of steroidal sapogenins present in the hydrolyzed butanolic extract of A. brittoniana leaves.

· Results and discussion: The mobile phase conditions were established ACN:water 90:10 (v.v), flow 1mL/min and detection at 203 nm, obtaining adequate linearity in the concentration range between 0.005 and 0.15 mg/mL. The use of the developed methodology allowed the separation and detection of the steroidal sapogenins present in the plant extract.

· Conclusions: The methodology was suitable for the detection of steroidal sapogenins in the hydrolyzed butanolic extract of A. brittoniana leaves

Resumen

· Problemática: Agave brittoniana Trel. spp. Brachypus (A. brittoniana), endémica de la región central de Cuba, con metabolito secundario mayoritario saponinas esteroidales, que pueden presentar múltiples acciones farmacológicas. Se hace necesario desarrollar una técnica analítica para la detección de sapogeninas esteroidales en los extractos obtenidos a partir de las hojas de la especie A. brittoniana.

· Objetivo(s): Determinar condiciones cromatográficas para técnica de detección de diosgenina por cromatografía líquida de alta eficacia y aplicarla para detección de sapogeninas esteroidales presentes en el extracto butanólico hidrolizado de hojas de A. brittoniana.

· Metodología: Se establecieron condiciones operacionales por HPLC para la determinación de diosgenina, sapogenina esteroidal similar a la yucagenina presente en el extracto vegetal, con columna C18, flujo 1 mL/min, volumen de inyección de 20 µL, a 35°C, detección UV-Vis; modificando la proporción de la fase móvil y la longitud de onda de detección. Se realizó prueba preliminar de linealidad en intervalo de concentraciones 0,005 a 0,2 mg/mL. Se aplicó la metodología para la detección de sapogeninas esteroidales presentes en el extracto butanólico hidrolizado de hojas de A. brittoniana.

Resultados y discusión: Se establecieron como condiciones fase móvil ACN:agua 90:10 (v.v), flujo 1mL/min y detección a 203 nm, obteniéndose linealidad adecuada en el intervalo de concentraciones entre 0,005 y 0,15 mg/mL. El empleo de la metodología desarrollada permitió la separación y detección de las sapogeninas esteroidales presentes en el extracto vegetal.

· Conclusiones: La metodología fue adecuada para la detección de sapogeninas esteroidales en el extracto butanólico hidrolizado de hojas de A. brittoniana.