En esta investigación se identificaron cuatro cepas de levaduras que exhibieron actividad lipolítica; de estas, los mejores resultados correspondieron a las cepas Debaryomyces vanrijiae CCEBI 2039 y Cryptococcus curvatus 74. Este estudio podría ser el primero donde se reporta la producción de enzimas lipolíticas extracelulares por la especie D. vanrijiae. La actividad enzimática se determinó de forma cualitativa y cuantitativa empleando los métodos siguientes: colorimétrico con indicador azul de bromotimol, colorimétrico con cobre/piridina y turbidimétrico con Tween 20/CaCl2, obteniéndose resultados favorables en todos los casos. Las lipasas se concentraron y purificaron mediante la técnica de cromatografía de intercambio iónico utilizando un intercambiador aniónico fuerte. Los pesos moleculares de algunas de las isoenzimas lipasa se determinaron mediante la técnica de electroforesis. La cromatografía de intercambio iónico, en la variante de elución con gradiente, permitió estimar una mayor cantidad de isoenzimas para la cepa CCEBI 2039, que lo observado en la electroforesis.