7th International Chemistry Symposium "SIQ 2019" -7th Conference "Chemical Sciences"

7th International Chemistry Symposium

SIQ 2019

Estandarización inmunohistoquímica de un anticuerpo monoclonal anti EGFR para su uso en la práctica clínica

Problemática: La inmunohistoquímica (IHC) es uno de los métodos más utilizados para la selección de pacientes candidatos para las terapias dirigidas contra blancos. Sin embargo, las diferencias en estos procedimientos aumentan la variabilidad intra e interlaboratorios y afectan la reproducibilidad del ensayo. Objetivo(s): Determinar las condiciones óptimas de tinción del anticuerpo monoclonal (mAb) ior EGF / r3 utilizando tejidos fijados en formol e incluidos en parafina. Metodología: La reactividad de los mAbs ior EGF/r3 y el clon 2-18C9 (PharmDxTM, Dako) se comparó en cortes de tejidos normales y en microarreglos tisulares procedentes de tumores de mama, colon y pulmón. La intensidad de la tinción se clasificó como: negativa (0), débil (1+), moderada (2+) e intensa (3+). Resultados y discusión: El bloqueo de las uniones inespecífica, la reanimación antigénica de los tejidos con pronasa y el empleo del sistema de detección polímero conjugado con peroxidasa, entre otros factores, favorecieron la inmunorreactividad con el ior EGF/ r3. Con ambos mAbs se detectó reactividad en la membrana y citoplasma de las células epiteliales de los tejidos normales y neoplásicos. Con ambos mAbs se detectó reactividad en la membrana y citoplasma de las células epiteliales de los tejidos normales y neoplásicos. En la mayoría de los tejidos positivos se observó un reconocimiento ligeramente más intenso con el clon 2-189C, que no afectó la correlación positiva de las intensidades del marcaje entre los dos anticuerpos (p < 0,0001; Prueba de Mantel). Conclusiones: Se desarrolló y estandarizó un procedimiento optimizado para la detección del EGFR con el empleo del mAb ior egf/r3 en muestras de tejido fijadas en formol e incluidas en parafina. El patrón de reconocimiento obtenido con los mAbs ior egf/r3 y el clon 2-18C9 mediante métodos inmunohistoquímicos fue comparable.

Problemática: La inmunohistoquímica (IHC) es uno de los métodos más utilizados para la selección de pacientes candidatos para las terapias dirigidas contra blancos. Sin embargo, las diferencias en estos procedimientos aumentan la variabilidad intra e interlaboratorios y afectan la reproducibilidad del ensayo. Objetivo(s): Determinar las condiciones óptimas de tinción del anticuerpo monoclonal (mAb) ior EGF / r3 utilizando tejidos fijados en formol e incluidos en parafina. Metodología: La reactividad de los mAbs ior EGF/r3 y el clon 2-18C9 (PharmDxTM, Dako) se comparó en cortes de tejidos normales y en microarreglos tisulares procedentes de tumores de mama, colon y pulmón. La intensidad de la tinción se clasificó como: negativa (0), débil (1+), moderada (2+) e intensa (3+). Resultados y discusión: El bloqueo de las uniones inespecífica, la reanimación antigénica de los tejidos con pronasa y el empleo del sistema de detección polímero conjugado con peroxidasa, entre otros factores, favorecieron la inmunorreactividad con el ior EGF/ r3. Con ambos mAbs se detectó reactividad en la membrana y citoplasma de las células epiteliales de los tejidos normales y neoplásicos. Con ambos mAbs se detectó reactividad en la membrana y citoplasma de las células epiteliales de los tejidos normales y neoplásicos. En la mayoría de los tejidos positivos se observó un reconocimiento ligeramente más intenso con el clon 2-189C, que no afectó la correlación positiva de las intensidades del marcaje entre los dos anticuerpos (p < 0,0001; Prueba de Mantel). Conclusiones: Se desarrolló y estandarizó un procedimiento optimizado para la detección del EGFR con el empleo del mAb ior egf/r3 en muestras de tejido fijadas en formol e incluidas en parafina. El patrón de reconocimiento obtenido con los mAbs ior egf/r3 y el clon 2-18C9 mediante métodos inmunohistoquímicos fue comparable.

About The Speaker

Mercedes Cedeño Arias

Dr. Mercedes Cedeño Arias

Centro de Inmunología Molecular Flag of Cuba
Practical Info
Spanish / Español
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30 minutes
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Authors
Meilyn cruz
Rancés blanco
Dr. Mercedes Cedeño Arias
Keywords
biomarcador
inmunocoloración
validación de anticuerpos