VIII International Symposium on Chemistry and Pharmaceutical Sciences

SICF

VIII Symposium "Design, Obtaining and Development of Drugs"

Characterization by Light Scattering techniques of the monovalent conjugate and intermediates of Soberana 02 vaccine.

Abstract

Managing the COVID-19 pandemic in addition to the sanitary measures, demanded the development of preventive vaccines at an accelerated pace. Soberana 02 vaccine is based on a conjugated antigen. This is a biomolecule composed by the SARS-CoV-2 receptor-binding domain (RBD) bonded to tetanus toxoid as a carrier protein. To achieve a functional antigen, the molecular assembled should be checked by reliable physicochemical methods. The light scattering based techniques are very useful for integrals studies of biomolecules. This work illustrates a wide use of light scattering techniques for characterizing the chemical modification of tetanus toxoid and the RBD. In addition, the work comprises the evaluation of the conjugates.
For the study a system equipped with an isocratic pump and UV detector was used. A GE-Healthcare Superdex 200 column (10 x 300 mm, 10 µm particle size) was used for the chromatography separation. The conditions included 10 mM PBS buffer as mobile phase at 0.6 mL/min of flow rate. In-line detectors also including a MALS (DAWN®) and a Optilab® differential refractive index (dRI) for assessing molecular weight and to evaluate the conjugation process by Static Light Scattering. A particle analyzer Anton Paar Litesizer™ 500 was used to measure the particle size distribution by Dynamic Light Scattering and Z potential by Electrophoretic Light Scattering to different molecules at 25 °C.
The use of light scattering techniques, allowed to study the identity, relative stability, size, weight and extension of the conjugation process for the biomolecules of the Soberana 02 vaccine.

Resumen

El manejo de la pandemia de COVID-19, además de las medidas sanitarias, exigió el desarrollo de vacunas preventivas a un ritmo acelerado. La vacuna Soberana 02 se basa en un antígeno conjugado. Se trata de una biomolécula compuesta por el dominio de unión al receptor (RBD) del SARS-CoV-2 unido al toxoide tetánico como proteína portadora. Las técnicas basadas en dispersión de luz son muy útiles para estudios integrales de biomoléculas. Este trabajo ilustra el uso de técnicas basadas en la dispersión de luz para caracterizar las modificaciones del toxoide tetánico y el RBD. Además, el trabajo comprende la evaluación de los conjugados monovalentes.

Para el estudio se utilizó un sistema equipado con bomba isocrática y detector UV. Se usó una columna GE-Healthcare Superdex 200 (10 x 300 mm, 10 µm) para la separación por cromatografía. Las condiciones incluyeron una disolución tampón PBS 10 mM como fase móvil a 0,6 ml/min de flujo. El sistema de detección en línea también incluyó un MALS (DAWN®) y un dRI (Optilab®) para evaluar el peso molecular y la extención de la conjugación por SLS. Se utilizó un analizador de partículas Anton Paar Litesizer™ 500 para medir la distribución del tamaño de las partículas mediante DLS y el potencial Z mediante ELS a las diferentes biomoléculas a 25 °C.

El uso de técnicas de dispersión de la luz permitió estudiar la identidad, estabilidad relativa, tamaño, peso y extensión de la conjugación en las biomoléculas componentes de la vacuna Soberana 02.