El Vitrofural®, producido en el Centro de Bioactivos Químicos (CBQ) de la Universidad Central “Marta Abreu” de Las Villas, se emplea como inhibidor de la contaminación microbiana para medios de cultivo utilizados en la producción de vitroplantas. Su acción está dada por la actividad antimicrobiana del ingrediente farmacéutico activo Furvina, que posee propiedades bactericida y fungicida de amplio espectro y es utilizado en la formulación de productos tópicos farmacéuticos. El objetivo de este trabajo es: validar la técnica de determinación del ensayo de disolución en lotes de Vitrofural® por espectrofotometría UV/Vis. Se realizó una validación exhaustiva, donde los parámetros a evaluar fueron: linealidad, especificidad, precisión, exactitud, estabilidad de las soluciones analíticas y evaluación del efecto del filtro. El método de ensayo resultó ser lineal en el intervalo de concentraciones de 9 µg/L a 14 µg/L, específico, preciso y exacto. Las soluciones analíticas son estables, protegidas de la luz y a temperatura ambiente, por un período de una hora después de su preparación. Además, se acepta la filtración con papel de filtro (tamaño de poro: 5 - 11 µm) como medio de filtración alternativo. Por tanto, se concluye que el método de ensayo es adecuado para los fines previstos.